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470nm ChR2光敏蛋白活化光源

作者:路阳仪器时间:2023-12-09 21:16浏览551 次

信息摘要:

LUYOR-3480-96RB体外光遗传学光源内置了96颗470nm led,适合96孔板照射,能够提供辐照强度为0-9mw的辐照功率,光强度通过旋钮进行调节,满足ChR2光敏蛋白的体外光遗传学的实验。

ChR2 ChRmine光敏蛋白活化光源

LUYOR-3480-96RB体外光遗传学光源(in vitro optogenetics)内置了96颗470nm led,适合96孔板照射,能够提供辐照强度为0-9mw的辐照功率,光强度通过旋钮进行调节,满足ChR2光敏蛋白的体外光遗传学的实验。

LUYOR-3480-150RB体外光遗传学光源内置了256颗470nm led,适合150mm培养皿的照射,能够提供辐照强度为0-9mw的辐照功率,光强度通过旋钮进行调节,满足ChR2光敏蛋白的体外光遗传学的实验。

LUYOR-3480光敏蛋白活化光源的特点:

  1. 470nm窄波段led满足CHR2辐照要求。

  2. 0-9mw辐照功率可调

  3. 长时间照射,温度控制在37度以下。

  4. 可选择96孔板和15cm培养板照射光源。

  5. 辐照光源和控制器线长2米,满足将辐照光源放置到细胞培养箱内辐照。

  6. 辐照光源防水设计,满足培养箱的高湿环境辐照。

  7. 256颗 led辐照,辐照面内光强度均匀。

3480-blues.jpg


常见光敏蛋白:

1、 激活型光敏蛋白:

(1) ChR2(H134R):视紫红质通道蛋白2(Channelrhodopsin-2,ChR2)的一种突变体,属于光控阳离子通道,在蓝光(更佳激活波长450nm)的激发下打开阳离子通道,使胞外阳离子内流。与ChR2相比,ChR2(H134R)的光敏感性较高,通道关闭速度较慢,因此增加了光电信号,但这也使得它的时间精度不如ChR2。

(2) ChETA:ChR2的另一突变体—ChR2(E123T),属于阳离子通道蛋白。ChETA的通道动力学比ChR2更快,降低了光电流幅度。然而,光敏感性大大降低,适用于高频率光刺激,且吸收光谱红移(更佳激活波长490nm),也可与钙离子成像实验同步。

(3) C1V1(t/t):是来自衣藻的ChR1和团藻的VChR1的嵌合突变体,包含两个氨基酸突变—E122T、E162T,因此称为C1V1(t/t)。属于黄光(更佳激活波长535nm)驱动的阳离子通道蛋白。

2、抑制型光敏蛋白:

(1) eNpHR3.0:来源于从盐碱古菌中分离出来的嗜盐细菌视紫红质蛋白(Natronomonas halorhodopsin,NpHR),这是一种氯离子泵,属于抑制型光敏蛋白。NpHR在哺乳动物细胞中过表达后定位于内质网,经改造后添加上内质网输出元件和kir2.1钾离子通道的上膜元件,使其能锚定在神经元细胞膜上,并增强光电流,升级为eNpHR3.0。在黄光(更佳激活波长590nm)的刺激下离子通道开放,引起Cl-内流,导致细胞内产生超极化反应,进而抑制神经细胞活动。eNpHR3.0是应用最为广泛的一种抑制型光敏蛋白。

(2)Arch3.0:来自盐红菌产生的古视紫红质(archaerhodopsin,Arch)的升级版,这是一种质子泵,能够响应黄光或绿光(更佳激活波长566nm),介导胞内H+外流。与其他抑制型光敏蛋白的等效版本相比,Arch具有更高的光电流和光敏感性,且能在轴突质膜中大量表达。然而,通过添加内质网输出元件和神经轴突靶向序列,对其功能进一步增强,升级为Arch3.0,可适用于轴突信号输出的快速抑制。这也使得Arch3.0能够实现稳健、快速且额、可逆的突触抑制。



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